《谷物中硒代蛋氨酸、硒酸鹽和亞硒酸鹽的測定》征求意見

2021-11-02 08:46:32 來源：儀表網(wǎng) 閱讀量：8097

　　由安康市富硒產(chǎn)品研發(fā)中心、北京市疾病預防控制中心的《谷物中硒代蛋氨酸、硒酸鹽和亞硒酸鹽的測定液相色譜-電感耦合等離子體質譜用法》團體標準已完成征求意見稿的編制。為保證標準的科學性、嚴謹性和適用性，現(xiàn)向社會各界公開征求意見。

　　硒是人體必需微量元素之一，具有預防癌癥、清除體內(nèi)自由基，抗衰老、抗氧化等作用，能保護細胞膜的結構和功能，增強機體免疫力，對于心血管功能、生育、視力等有重要影響。缺硒會導致克山病、冠心病、大骨節(jié)病、糖尿病等多種疾病。雖然硒對人體而言是營養(yǎng)元素，但研究發(fā)現(xiàn)硒的安全閾值較窄，硒攝入量超過安全閾值時則會對人體健康造成危害，發(fā)生急性或慢性硒中毒，在我國湖北恩施曾發(fā)生大范圍人、畜脫毛、脫甲等中毒癥狀，安康紫陽也有類似的現(xiàn)象發(fā)生，其原因為高硒土壤環(huán)境所致的硒中毒。因此，科學、合理的攝入硒對健康才是安全有效的。國際學術組織聯(lián)合會建議成年男女膳食硒適宜需要量分別為 40 微克/ 日和 30 微克/日。英國規(guī)定人體每日攝入量為 70 微克。1988 年，中國營養(yǎng)學會推薦成人膳食的日攝入量為 50～250 微克。目前全球有 40 多個國家和地區(qū)不同程度缺硒，我國 72%地域人群缺硒，缺硒是一個世界性問題。

　　隨著對硒元素研究的深入，人們更多關注硒的營養(yǎng)價值，由于中國大部分地區(qū)缺硒，近年來各種富硒保健品、富硒食品紛紛面世，隨著功能農(nóng)業(yè)的發(fā)展，富硒農(nóng)產(chǎn)品更是百花齊放，如富硒大米、富硒小麥等富硒谷類食品的研究日益受到人們的青睞。天然富硒農(nóng)產(chǎn)品越來越受到人們的關注，其需求量和種類要求也越來越多。但同時市場上的富硒產(chǎn)品良莠不齊，消費者對富硒產(chǎn)品的認識不足，天然富硒農(nóng)產(chǎn)品與功能富硒農(nóng)產(chǎn)品的差異等，都急需對硒有進一步的研究和認識。在自然界，硒以不同的化合物形式存在，硒的毒理學和生理學研究進一步表明，硒的不同形態(tài)在生理毒性和生物利用率等方面各不相同，有機形態(tài)存在的硒，如硒蛋白、硒代氨基酸、硒多肽等在機體內(nèi)能轉變?yōu)樯砘钚晕镔|，為人體所吸收利，硒的生物功能取決于有益形態(tài)的硒含量。因此，僅測定谷類食品中總硒含量不能滿足目前食品安全與食品營養(yǎng)的需要，需要進一步測定硒在谷類食品中的存在形式。

　　進行硒形態(tài)研究分析，首先應將各種硒形態(tài)化合物從樣品基體中有效的提取出來，并避免硒形態(tài)的降解和各硒形態(tài)之間的轉換。目前農(nóng)產(chǎn)品中硒形態(tài)的提取方法主要有浸提法和酶解提取法，在進行樣品分析時，首先要根據(jù)農(nóng)產(chǎn)品中硒形態(tài)的種類和含量，權衡前處理操作簡便于否、提取效率及操作成本等進行優(yōu)化選擇。

　　研究報道硒在農(nóng)產(chǎn)品中主要以有機硒形式存在，包括硒代氨基酸、硒蛋白、硒多糖和硒核酸等。農(nóng)產(chǎn)品樣品經(jīng)過提取處理后，需要對提取液中的硒形態(tài)進行有效分離和準確測定。目前，在硒形態(tài)分析中常用的分離方法主要為色譜分離方法，包括氣相色譜(GC)和高效液相色譜(HPLC)。電泳技術在硒形態(tài)分析中也有相關報道，主要包括毛細管電泳(CE) 和凝膠電泳(GE)。常用的檢測方法有電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)、原子熒光光譜 (AFS)、原子發(fā)射光譜(AES)、原子吸收光譜(AAS)等。本研究采用靈敏、準確的高效液相色譜(HPLC)與電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)聯(lián)用技術進行農(nóng)產(chǎn)品中硒形態(tài)化合物的分析測定。

　　本標準規(guī)定了液相色譜-電感耦合等離子體質譜聯(lián)用法測定谷物中硒代蛋氨酸、硒酸鹽和亞硒酸鹽含量的方法。

　　方法原理：

　　試樣中硒代蛋氨酸、硒酸鹽和亞硒酸鹽通過蛋白酶酶解后，經(jīng)離子交換色譜柱分離，電感耦合等離子體質譜儀測定，以色譜保留時間定性，外標法定量。

　　儀器與設備：

　　1.液相色譜-電感耦合等離子體質譜聯(lián)用儀(LC-ICP-MS)。2.天平：感量分別為 0.01 mg、0.1 mg 和 1 mg。3.低溫離心機：轉速≥9000 r/min。4.恒溫超聲波清洗器：可控溫 0 ℃～80 ℃(溫度精度±2 ℃)。5.pH 計：精度為 0.01。6.高速粉碎機：轉速≥3000 r/min。7.水系濾膜：0.22 μm。

　　樣品預處理：

　　大米、小麥、玉米等樣品去雜物后粉碎，并過 60 目篩混合均勻，裝入潔凈聚乙烯瓶中，于干燥處密封保存?zhèn)溆谩?br />

　　試樣提?。?br />

　　稱取 0.1 g～0.5 g(精確到 0.001 g)樣品，置于 15 mL 離心管中，加入 5 mL 水和 20 mg 蛋白酶 XIV，渦旋 30 s，37 ℃水浴超聲 3 h，期間振搖數(shù)次。靜置 10 min，4 ℃下以 9000 r/min 離心 10 min，取上清液過 0.22 μm 濾膜，待測。同時做空白試驗。

　　試樣測定：

　　依次將空白溶液和試樣溶液注入液相色譜-電感耦合等離子體質譜聯(lián)用儀中，得到色譜圖，以色譜保留時間進行定性。根據(jù)標準曲線得到試樣溶液中硒代蛋氨酸、硒酸根、亞硒酸根的濃度，平行測定次數(shù)不少于兩次。

　　本標準適用于大米和小麥中硒代蛋氨酸、亞硒酸鹽和硒酸鹽的測定；玉米中硒代蛋氨酸和硒酸鹽的測定。

　　當樣品稱樣量為0.3 g，提取液體積為5 mL時，硒代蛋氨酸方法定量限為0.015 mg/kg、硒酸鹽方法定量限為0.010 mg/kg、亞硒酸鹽方法定量限為0.007 mg/kg。

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