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《蘋果中根皮苷的檢測方法高效液相色譜法》國家標(biāo)準(zhǔn)征求意見

2021-10-14 08:59:13 來源：儀表網(wǎng) 閱讀量：8199

　　根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會國家標(biāo)準(zhǔn)制修訂計劃，由中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口的《蘋果中根皮苷的檢測方法高效液相色譜法》(計劃號：20205076-T-424)國家標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)已形成征求意見稿，按照《國家標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》的有關(guān)規(guī)定，現(xiàn)向社會各界公開征求意見。

　　根皮苷含量作為是公認的蘋果質(zhì)量評價的關(guān)鍵性質(zhì)量指標(biāo)，作為一項蘋果的品質(zhì)評價指標(biāo)具有重要的意義。但是目前針對蘋果質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)中，由于缺乏蘋果中根皮苷的檢測方法，在目前已經(jīng)發(fā)布實施的國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 10651-2008 《鮮蘋果》沒有設(shè)置根皮苷含量這一重要的質(zhì)量評價指標(biāo)，而是設(shè)置了簡單的可溶性固形物含量等這一較為常見的質(zhì)量指標(biāo)，不利于蘋果行業(yè)的進一步健康發(fā)展。因此，這項通用基礎(chǔ)性的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的制定，將為今后所有蘋果相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的制定奠定良好的基礎(chǔ)。

　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用高效液相色譜法測定蘋果中根皮苷含量的原理、材料、儀器與設(shè)備、測定步驟、結(jié)果計算與表示、精密度和回收率、檢驗報告。

　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范性引用文件包括：GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法；GB/T 6379.2 測量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精密度)第2部分：確定標(biāo)準(zhǔn)測量方法重復(fù)性與再現(xiàn)性的基本方法。

　　方法原理：

　　蘋果試樣用 90%乙醇提取等樣品前處理方法，然后經(jīng) C18 色譜柱分離，二極管陣列檢測器檢測，色譜峰保留時間定性，外標(biāo)法定量。

　　儀器和設(shè)備：

　　1、0.45 µm 微孔水相濾膜，0.45 µm 針筒式有機相過濾器。2、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

　　分析步驟：

　　試樣制備：

　　將蘋果樣品，用干凈紗布輕輕將樣品表面擦凈，將其切碎，混合均勻，稱取 20.00 g 樣品(精確到0.001g)加入 90%乙醇水溶液 100 mL，6000 r/min，勻漿 3 min，再加入 300 mL90%乙醇水溶液轉(zhuǎn)移至1L 圓底燒瓶中，放入梭形轉(zhuǎn)子，輕輕搖晃使樣品和溶劑混合均勻，調(diào)節(jié)磁力攪拌器使轉(zhuǎn)子能夠帶動溶液攪拌，80℃加熱回流 1h 后(保證回流速度達到 1 滴/s，如果未到達，適當(dāng)提高 1~2℃)，冷卻過濾，45℃旋蒸，旋蒸至 60 mL，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加 80 mL 乙酸乙酯萃取兩次，(如有乳化現(xiàn)象，通過 4000 r/min，離心 2 min 進行破乳)合并兩次的乙酸乙酯相于 250 mL 圓底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，每次采用1.0 mL 色譜甲醇清洗圓底燒瓶 3 次，全部轉(zhuǎn)移至 5 mL 容量瓶中，加色譜甲醇定容至刻度，過 0.45 µm針筒式有機相過濾器，即為試樣液。

　　試樣測定：

　　將試樣液注入高效液相色譜儀中，以保留時間定性，同時記錄其峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出試樣液中根皮苷的濃度，平行測定次數(shù)不少于三次。待測試樣中根皮苷的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進行分析。

　　本方法線性范圍為5 μg/mL ~ 1000 μg/mL。檢出限：以3倍基線噪音信號確定檢出限: 6.85 ng/mL,定量限：以10倍基線噪音信號確定定量限22.83 ng/mL。蘋果試樣取樣量為20 g，確定檢出限為0.83μg/mL，定量限為2.78 μg/mL。

　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于蘋果中根皮苷定性和含量測定。

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