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速率散射比濁法檢測補體C3、C4

    補體（complement，C）是由近20種不同血清蛋白組成的多分子系統(tǒng)，約占血清球蛋白總量的10％。補體在血清中的含量相對穩(wěn)定，不因免疫應(yīng)答而增加，僅在某些病理情況下才會發(fā)生波動。補體系統(tǒng)的基本組成包括9種血清蛋白成分，按發(fā)現(xiàn)的先后順序而分別命名為C1-9。補體是一個復(fù)雜的反應(yīng)系統(tǒng)，除了溶解細胞和協(xié)助殺菌作用外，還可促進炎癥反應(yīng)，與其他生物活性系統(tǒng)有相互促進、相互制約的關(guān)系，這些關(guān)系的紊亂是導(dǎo)致許多疾病損傷的物質(zhì)基礎(chǔ)。C3是一種β球蛋白，是補體中含量zui多、作用zui重要的一個組分，是補體兩條主要激活途徑的中心環(huán)節(jié)，有重要的生物活性作用，可在肝臟中產(chǎn)生。C4是由肝臟、巨噬細胞合成的，參與經(jīng)典激活途徑，是補體中含量僅低于C3的重要組分。常用檢測方法為速率透射比濁法、速率散射比濁法等。

    [檢測方法]  速率散射比濁法

    [方法學(xué)原理]  抗原（C3、C4）與抗體（抗C3、抗C4）在液相中可快速反應(yīng)，形成的免疫復(fù)合物顆粒具有特殊的光學(xué)特性，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。速率是指單位時間內(nèi)抗原、抗體形成免疫復(fù)合物的速度。隨著時間的延長免疫復(fù)合物總量是逐漸增加的，而速率變化為慢+快一慢，其反應(yīng)速率zui快的某一時間稱為速率峰。當(dāng)反應(yīng)體系中的抗體量過剩時，速率峰的高低只與C3、C4含量成正比，儀器將測得的速率峰值通過對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的C3、C4濃度。

    [標(biāo)本準(zhǔn)備]  空腹靜脈血2ml，不抗凝。

    [試劑]  免疫比濁儀配套C3、C4試劑盒，內(nèi)含有稀釋液、緩沖液、抗血清等，按說明書配制。

    [儀器]  全自動特種蛋白分析儀。

    [檢測步驟]

    1．標(biāo)本處理，3 500rpm離心lOmin，分離血清。

    2．根據(jù)操作程序進行樣品測定：

    （1）輸入杯號；

    （2）選擇所測項目C3、C4；

    （3）存盤；   

    （4）編程完畢后，將標(biāo)本放人標(biāo)本杯中，且放入標(biāo)本盤中相應(yīng)位置，將所做項目的試劑放人試劑盤中相應(yīng)位置，確認無誤后，開始運行特種蛋白分析儀。

    [正常參考值]  C3：0．8～1．55g／L5C4：0．12～0．36g／L。   

    [注意事項]

    1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)置室溫環(huán)境中平衡。   

    2．試劑瓶蓋打開時應(yīng)注意打破瓶口的液膜，以防液感儀感應(yīng)錯誤。

    3．血清中若含有脂類應(yīng)高速離心分離脂質(zhì)，防止假濁度產(chǎn)生。

    [臨床意義]  在感染性疾病中，急性感染期可見C3、C4增高。由于補體在肝細胞中合成，所以重癥病毒性肝炎、慢性病毒性肝炎，特別是轉(zhuǎn)化為肝硬化后，C3、C4水平均下降。